Elektrofores är en laboratorieteknik som utförs med målet att separera molekyler beroende på deras storlek och elektriska laddning så att diagnos av sjukdomar kan göras, proteinuttryck kan verifieras eller mikroorganismer kan identifieras.
Elektrofores är ett enkelt och billigt förfarande som används i laboratorierutiner och i forskningsprojekt. Enligt syftet med elektrofores kan det vara nödvändigt att utföra andra tester och prov för att till exempel få en diagnos.
Vad är det för
Elektrofores kan utföras för flera syften, både i forskningsprojekt och för diagnos, eftersom det är en enkel och billig teknik. Således kan elektrofores utföras för att:
- Identifiera virus, svampar, bakterier och parasiter, den vanligaste är denna applikation i forskningsprojekt; Faderskapstest; Kontrollera uttrycket av proteiner; Identifiera mutationer, som är användbara vid diagnos av leukemi, till exempel; Analysera typerna av cirkulerande hemoglobin, användbar vid diagnos av sigdcellanemi; Bedöm mängden proteiner som finns i blodet.
Enligt syftet med elektroforesen kan det vara nödvändigt att utföra andra komplementära test för läkaren för att slutföra diagnosen.
Hur det görs
För att utföra elektrofores är det nödvändigt att gelén, som kan vara av polyakrylamid eller agaros beroende på objektivet, elektroforesbuffert och kar, molekylviktmarkör och ett fluorescerande färgämne, utöver en UV- eller LED-ljusutrustning, även känd som transilluminator.
Efter beredningen av gelén måste ett specifikt föremål placeras så att brunnarna görs i gelén, populärt kallad kammen, och låt gelén sätta sig. När gelén är klar, applicera bara ämnena på brunnarna. För detta måste en molekylviktmarkör placeras i en av brunnarna, en positiv kontroll, som är det ämne som är känt vad det är, en negativ kontroll, som garanterar reaktionens giltighet, och proverna som ska analyseras. Alla prover måste blandas med ett lysrör, eftersom det på detta sätt är möjligt att visualisera banden på transilluminatorn.
Gelén med proverna måste placeras i elektroforesvatten, som innehåller den specifika buffertlösningen, och sedan slås enheten på så att det finns elektrisk ström och följaktligen potentialskillnad, vilket är viktigt för separationen partiklar beroende på deras belastning och storlek. Den elektroforetiska körtiden varierar beroende på syftet med proceduren och kan pågå i upp till 1 timme.
Efter den bestämda tiden är det möjligt att se resultatet av den elektroforetiska körningen genom transilluminatorn. När gelén placeras under UV- eller LED-ljus är det möjligt att visualisera bandmönstret: ju större molekylen, desto mindre dess migration, närmare brunnen, medan ju lättare molekylen är, desto större migrationspotential.
För att reaktionen ska valideras, måste den positiva kontrollens band visualiseras och ingenting måste visualiseras i den negativa kontrollen, eftersom det annars är en indikation på att det fanns förorening och hela processen måste upprepas.
Typer av elektrofores
Elektrofores kan utföras för olika ändamål och enligt dess syfte kan flera typer av geler användas, varvid de vanligaste är polyakrylamid och agaros.
Elektrofores för att identifiera mikroorganismer är vanligare att utföras i forskningslaboratorier, men för diagnostiska ändamål kan elektrofores användas för att identifiera hematologiska sjukdomar och sjukdomar som utvecklas med ökningen av mängden proteiner, som är de viktigaste typerna av elektrofores:
1. Hemoglobinelektrofores
Hemoglobinelektrofores är en laboratorieteknik som utförs för att identifiera de olika typerna av hemoglobin som cirkulerar i blodet, vilket gör det möjligt att identifiera förekomsten av sjukdomar relaterade till hemoglobinsyntes. Typen av hemoglobin identifieras med hjälp av elektrofores vid ett specifikt pH, helst mellan 8, 0 och 9, 0, med ett mönster av band som verifieras som kan jämföras med det normala mönstret, vilket möjliggör identifiering av närvaron av onormala hemoglobiner.
Vad det görs för: Hemoglobinelektrofores görs för att undersöka och diagnostisera sjukdomar relaterade till hemoglobinsyntes, såsom sigdcellanemi och hemoglobin C-sjukdom, förutom att de är användbara vid differentiering av talassemi. Lär dig att tolka hemoglobinelektrofores.
2. Proteinelektrofores
Proteinelektrofores är en undersökning som läkaren begär för att bedöma mängden proteiner som cirkulerar i blodet och därmed identifiera sjukdomar. Detta test görs från ett blodprov, som centrifugeras för att erhålla plasma, den del av blodet som bland annat består av proteiner.
Efter elektrofores kan ett mönster av band visualiseras och därefter ett diagram i vilket mängden av varje fraktion av proteiner indikeras, vilket är grundläggande för diagnosen.
Vad det görs för: Proteinelektrofores gör att läkaren kan undersöka förekomsten av multipelt myelom, dehydrering, skrump, inflammation, leversjukdom, pankreatit, lupus och hypertoni enligt bandmönstret och diagrammet som presenteras i undersökningsrapporten.
Förstå hur det görs och hur man förstår resultatet av proteinelektrofores.
